Ploskireva medium (Bacto-agar F): beskrivning. medicinsk mikrobiologi

Ploskireva medium (nedan kallad fortfarande Bacto agar F) är ett näringsmedium för odling av vissa mikroorganismer, i huvudsak Shigella och Salmonella. Som en källa för hennes användning infekterade material: urin, galla, avföring.

berättelse

Nikolay Ivanovich Ploskirev - sovjetiska mikrobiolog och hedrad läkare. Han föddes 1869 och dog 1948, efter att ha arbetat större delen av sitt liv i sin hemstad - Tomsk.

År 1888, han framtiden vetenskapsmannen, utan att slutföra den sjätte klass i skolan, gick med i armén. han kunde fullfölja utbildningen endast 1892, passerade sedan undersökningarna för tillträde till Imperial Tomsk University studerade han vid Medicinska fakulteten. År 1898 fick han titeln läkare.

Ploskirev deltog i rysk-japanska kriget, och efter det fungerade i Tomsk sjukhuset. År 1910 utsågs han till posten som chef för Tomsk dermatologiska och veneriska sjukhuset och trettio år har varit dess permanenta huvud. Samma forskare var en av grundarna av STI klinik i Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev skrev en serie verk ägnas åt kampen mot könssjukdomar.

struktur

Onsdag Ploskireva - material för odling av tarmbakterier och måste därför innehålla flera typer av näringsämnen. Den produceras i torr form.

Ganska en stor del av dess totala vikt är pankreatiskt hydrolysat skarpsill (10,4 g / l). Något mindre stod för hydrocitrate dibasiskt natrium (8,5 g / I). Också att det finns en torr näringsbuljong och mjölksocker (8,62 och 7,3 g / l).

Den andra titeln Ploskireva-medium - J. Bacto-agar i kompositionen den är närvarande i en mängd av agar, 6,94 g / I. Seriovatistokislogo vattenfri natriumhalt lika med 5,1 g / I. Det är närvaron av vattenfritt dinatriumfosfat - 2,1 g / I, natriumsalter av cholsyra ca 3,46 g / I och kalcinerad soda - 2,4 g

Mindre än ett gram däri indikatorer - neutralrött (0,05) och briljantgrön (0,0002). Innehållet jod - 0,13.

ansökan

Studien av de biokemiska processer av bakterier spelar en mycket viktig roll vid diagnos av sjukdomar som orsakar anaeroba organismer. Arter i denna familj - hundratals. De är nästan identiska i morfologi och kulturella egenskaper, och mest pålitliga sättet att skilja dem från varandra - är studiet av biokemi.

Studien börjar med ympning av patologisk material i odlingsmediet. Hon patologisk avvikelsen för koliforma bakterier och en del av den, förutom vanlig agar, inkluderar ljus och laktos. Bearbetning förmåga laktos - ett viktigt tecken på differentiering av enterobakterier. Om detta upptäcks, skiftar pH mot surhet och indikatorn aktiveras, som vänder kolonin.

Andra länder kan använda andra näringsmedier, men deras verkningsmekanism motsvarar de tre vanligaste i Ryssland - denna miljö Endo och Levine Ploskireva onsdag.

Beskrivning av förfarandet

Utomlands Ploskireva analog mediet är en så kallad MacConkey Agar. I färdig form transparent lösning har en ljust rosa-gul färg. Kolonier som kan bearbeta laktos, bland Ploskireva ger röd (tranbär) färg. Om bakterierna inte kan bearbeta den eller koloni är färglös eller har en svag färg.

Med tanke på att sammansättningen av mediet innefattar ämnen Ploskireva inhibitorer (briljantgrönt, gallsalter, jod), det är nästan fullständigt inhiberar tillväxten av grampositiva flora, såsom i den första dagen eshehiry fördröjer signifikant tillväxten, liksom andra vanliga åtföljande mikroflora.

andra benet

Ytterligare av intresse är valet av kolonin, och det är seedade på en primär lagringsmedium och differentiering. Miljö där det finns sådd bör innehålla flera substrat. Bakteriell kultur bör upptäcka enzymatisk aktivitet med avseende på dem, samma medium placeras i rören så att det finns två platser:

• en i vilken lutande agar;
• med en kolonn.

Intresset för forskare inom kolonin befolkade avfasning tät stroke och i en kolumn - en prick. I detta skede använde mediet Russell, Kligler eller Olkenitskogo. Som differentialdiagnos som används och Ploskireva onsdag.

Mikrobiologi av patogener och

Agar Ploskireva är en viktig faktor i att upptäcka infektioner orsakade av Enterobacteriaceae. Så, till exempel, är det odlas och differentierade kolonier av mikroorganismer som orsakar bacillär dysenteri. Denna anaeroba organismer som tillhör släktet Schigella.

Som alla som är en del av en familj av tarmbakterier, shigella har formen av stavar, storleken på två mikrometer. De utgör inte kapslar och sporer har flag - det gör att de kan särskiljas från Salmonella, vilket i sin tur är rörliga. De växer bra på de flesta enkla medier, vid en temperatur något över omgivningens (35-37 ° C) och 7,4 pH. Genom den typ av tillväxt, behöver kolonier inte skiljer sig från Salmonella.

Såsom diskuterats ovan, kan mikroorganismer vara väsentligen morfologiska skillnader emellertid variera kraftigt i biokemiska processer i livet. Således, med undantag för Shigella Nyukestl, utan bildning av sur gas sker under fermentation av kolhydrater. Med undantag för Shigella sonnei, kan de inte jäsa laktos, men rötas glukos. Bara för att de viktigaste funktionerna kan du bära dem vad de kan för att minska niraty till nitrit. Deras kolonier digererades med karbamid, såväl som i odlingsmediet finns ingen förvätskning av gelatin.

Insamling och förberedelse av utsäde

Att detektera medel av dysenteri, krävs mikrobiologiska tester angripna miljöer, dvs avföring patient. Vid mottagandet av materialet, du behöver så snabbt som möjligt för att göra sådden. Om detta inte är möjligt måste källan vara placerad i ett konserveringsmedel - en blandning av fosfatbuffert eller glycerol. Vid 4 ° C, kan de lagras under mer än en dag. Samla det material han måste utföras med hjälp av en rektal glasrör, vilket är infört in i ändtarmen.

För studier av ett material valt purulent slem stycken som skall tvättas i två till tre tuber isoton natriumkloridlösning.

Tillämpning av patogena bakterier i miljön Ploskireva gjorde glas spatel. Du måste gnugga på en liten del av sin agar, sedan riva av spateln på miljön, och det återstående materialet gnids in de besådda ytan. Om sådd sker i ett par koppar, sedan till var och en av dem behöver för att plantera en ny sats.

Om muko-variga bitar där att ta på en särskild analys, betyder det inte att det inte finns någon förekomst av patogener. I ett sådant fall är det nödvändigt att emulgera avföring i 10 ml natriumklorid (koncentration 0,85%) och därefter sår en eller två droppar på ett medium Ploskireva. Icke-emulgerade stol kan sås i selenitovy buljong. Han använde också, om man istället för avföringen är kräkas eller tvättar.

mikrobiologisk diagnos

I det första steget av mikrobiologiska studier genomförts sådd av patogena bakterier i två koppar, för att sedan titta på hur man odlar Shigella. På onsdag Ploskireva producerade en gröda, och den andra - på miljön eller Endo Levin.

På grund av det faktum att det fanns stammar av Shigella är resistenta mot antibiotika, till mediet kompletterades med kloramfenikol. Då den förekommer inom dagar inkubation i en inkubator vid 37 ° C.

Den andra dagen för att utforska de odlade kolonierna. De som inte är på differential diagnostiskt medium vuxit färglös, är det nödvändigt att sålla ut Russells medellång eller kort "brokig rad." Ytterligare forskning bedrivs av algoritmen av de primära grödor på dem. Kolonier av Shigella på onsdag Ploskireva växer i form av transparenta, färglösa och små kolumner. De är av två typer:

• tillplattad med ojämna kanter;
• rundad, konvex, med en typisk våt glans.

Tre eller fyra kolonier måste mikroskopirovat och undersöktes för rörlighet. Om det senare inte dyker upp, de flyttade på onsdagen Olkenitskogo att isolera en ren kultur. I frånvaro av karakteristiska kolonier Shigella eller om ingen tillväxt observeras alls, är det nödvändigt att Endo agar eller Ploskireva producerar sådd av selenitovogo buljong. Om typiska kolonier förekommer i tillräckligt antal, satte den beräknade agglutination. En blandning av sera sonnei och Flexner, inträffar reaktion på glaset.

ytterligare forskning

På den tredje dagen finns förändringar som har skett i kolonierna på mediet Russells. Om det finns en kultur som inte försämrar laktos och glukos jäser att producera en syra, det separeras och analyseras, spendera mikroskopi, samt utföra sådd i "brokiga raden", men den här gången utvidgas. Bara sätta agglutinationsreaktionen, för att serologiska identifieringen.

På den sista dagen, kan man dra slutsatsen på basis av förändringar i "brokiga number" (om det finns jäsning av kolhydrater), samt sammanfattar agglutinationsreaktion.

Lagring och beredning

Framställning av agar Ploskireva sker enligt följande:

1. 55 g torr substans omröres i en liter destillerat vatten.
2. Kokt i två till tre minuter tills ägarn inte ännu helt smält.
3. Häll i petriskålar (sterilitet valfritt) skikt av 5-6 mm.
4. Plattorna lämnas öppen under en halv timme vid rumstemperatur (18-25 grader). Efter denna tid mediet är tillräckligt härda och torr.

Onsdag Ploskireva känsliga och hygroskopisk. Pulvret bör lagras i en försluten förpackning, måste den relativa luftfuktigheten i rummet inte överstiga 60%. Den optimala temperaturen för lagring av 2 ° C till 25 ° C. Lagring måste följa dessa regler, annars möjliga felaktiga resultat.