Mikrobiologiska metoder för undersökning av vatten, jord och luft

Mikroorganismer - små, mestadels encelliga varelser, som är utbredd i naturen. De finns i alla medier (luft, jord, vatten) i människor och djur, växter.

Kvalitativ mångfald och antal organismer beror främst på näringsföreningar. Men det är också viktigt eftersom fukt, temperatur, luftning och effekten av solljus och andra faktorer.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Metoder för sanitära och mikrobiologiska studier naturliga medier kan detektera närvaron av patogener, och att bestämma deras omfattning i enlighet med de erhållna resultaten, för att utveckla åtgärder för att avlägsna eller förhindra infektionssjukdomar. Dessutom behövs kvantitativa står för ekosystemmodellering och utveckling av de naturliga processerna för styrning. . Låt oss betrakta vidare vilka metoder för mikrobiologisk undersökning.

jord

Det anses av forskare som en av de möjliga vägarna för överföring av smittsamma sjukdomar. Med sekret människors eller djurs patienten i jord genomträngande patogener. Några av dem, i synnerhet spore kan finnas kvar i marken under lång tid (ibland i årtionden). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Hösten patogener jord sådana farliga infektioner såsom stelkramp, mjältbrand, botulism, och så vidare. Methods of sanitära-mikrobiologisk studie av jorden kan du definiera "mikrobräkning" (antalet mikroorganismer i jorden av ett gram), och coli index (antalet E. coli) .

Markanalys: en översikt

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Metoder för mikrobiologisk undersökning av marken bör i första hand tillskrivas direkt mikroskopi och kultur på fast näringsmedium. Populationer av mikroorganismer och deras grupper som lever i jord, skiljer sig på den taxonomiska status och ekologiska funktioner. Inom vetenskapen, de förenas under samlingsnamnet "jord biota." Primer - habitat stort antal mikroorganismer. I gram jord är närvarande mellan 1 och 10 miljard av sina celler. I denna miljö, tar aktivt nedbrytning av organiskt material, med deltagande av olika saprofytiska mikroorganismer.

Mikroskopiska studier av mikrobiologisk metod: stegen

Analys av mediet börjar med provtagning. För detta ändamål, tidigare skalade och riven alkohol kniv (spade kan användas). Efter det, provberedningen. Nästa steg - räkna celler utstryksprover. Överväga varje steg för sig.

provtagning

I analysen av jordbruksjordar tenderar prov taget från ett djup av hela skiktet. Avlägsnas först 2-3 cm över marken, eftersom det kan vara närvarande i en främmande mikrofloran. Därefter med en yta på marken studerade ta monoliter. Längden på var och en av dem måste överensstämma med tjockleken på lagret som du vill ta prov.

På en tomt på 100-200 kvadratmeter. 7-10 m utvalda prover. Vikten av varje - av storleksordningen 0,5 kg. Proverna måste blandas ordentligt i påsen. sedan ta genomsnittsprov som väger ungefär 1 kg. Det ska placeras i pergament (steril) förpackning innesluten i en tygpåse. Före direkt analys av provet förvaras i kylskåp.

undersökning Framställning

Den omrörda jorden hälldes på torrt glas. Dess pre-torka med alkohol och bränna ovanför brännaren. Med en spatel jord blandas omsorgsfullt och expanderade jämnt. Det är obligatoriskt att ta bort rötter och andra främmande element. För att göra detta använder pincett. Före drift pincett och spatel ovanför brännaren antänds och får svalna.

Av de olika jord tomter fördelade på glaset, valda små portioner. De vägde i en porslinsskål på en teknisk skala. является специальная обработка образца. Obligatoriskt steg mikroskopisk metod för mikrobiologiska studier är den bearbetning av provet. 2 måste beredas i förväg, steril kolv. Deras storlek bör inte överstiga 250 ml. En av kolvarna hälls i 100 ml kranvatten. Eftersom det tar 0,4-0,8 ml vätskeprov av jord och fuktas till en pasta. Blandningen bör smörjas med ett finger eller gummi mortelstöt under 5 minuter.

Vatten från den första kolven överfördes till jordmassa tom kolv. Vidare gnugga ryggen. Efter denna massa överförs till en kolv nära brännarens flamma. Behållare med jord suspensionen skakades på en skakanordning under 5 min. Därefter var det tillåtet att sätta sig i ca 30 sekunder. Detta är nödvändigt för att tillåta stora partiklar att sedimentera. Efter en halv minut massa används för att bereda beredningen.

Celltal på fasta utstryk

, разработанному Виноградским. Direkt mikroskopisk undersökning av marken utförs av metoden för mikrobiologiska studier utvecklade Vinogradskii. I viss volym av suspensionen räknades antalet celler av mikroorganismer. Studera fasta utstryk kan lagra läkemedel på lång sikt och utföra beräkningar som helst.

Beredning av läkemedlet som följer. En viss mängd av uppslamningen (typiskt 0,02-0,05 ml) anbringas med en mikropipett på objektglaset. Till denna lösning sattes en droppe av agar-agar (polysackarid agaropektin blandningen och agaros extraherad från brunt och rödalger Svarta havet), omrördes snabbt och sprids över ett område 4-6 sq. cm. Pap lufttorkades och fixerades i 20-30 minuter. alkohol (96%). Nästa, läkemedlet fuktad med destillerat vatten och placerades i p-p carbolic erytrosin 20-30 min.

Efter färgning, är det tvättas och torkas i luft. Cellräkningar utförs från immersion linsen.

Sådd på fasta medier

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Mikroskopiska metoder för mikrobiologisk undersökning kan upptäcka ett stort antal mikroorganismer. Men trots detta, metoden är den vanligaste ympning i praktiken. Dess väsen består i att ympa mängd av läkemedlet (jordsuspension) i en petriskål på ett fast medium.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Denna metod för mikrobiologisk forskning tar hänsyn inte bara kvantiteten utan även gruppen, och i vissa fall, och artsammansättning av de mikroskopiska floran. Räkning av antalet kolonier som produceras, vanligtvis från botten av petriskålen i genomlysning. På den beräknade området placerat en markör eller bläck prick.

Analys vatten

Mikrofloran i vattenkroppen, som regel, återspeglar den mikrobiella sammansättningen av jorden runt den. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. I detta sammanhang, metoder för sanitära-mikrobiologisk analys av vatten och mark är av särskild praktisk betydelse i studien av tillståndet hos en viss ekosystem. Det färska vattnet innehåller, som regel, kocker, stavformade bakterier.

Anaerober i vatten som finns i små mängder. Som regel, de förökar på botten av vattendrag, i leran, som deltar i processen för rening. Mikroflora haven fördel representerade SALT (halofila) bakterier.

I vattnet, artesiska brunnar är praktiskt taget inga mikroorganismer. Detta beror på filtreringskapaciteten hos jordskiktet.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Konventionella metoder för mikrobiologisk vattenforskning anses definitionen av mikrobiella och coli-titer eller om-index. Den första indikatorn definierar antalet bakterier i en ml vätska. Coli index representerar antalet koliformer närvarande i en liter vatten, och om titern - det minsta antalet eller maximal utspädning vätska i vilken de kan fortfarande detekteras.

Bestämning av mikrobiell antal

Denna metod sanitetsmikrobiologisk undersökning av vatten är som följer. I 1 ml vatten bestäms antal mesofila och fakultativa anaerober (mellanliggande) aerober kan på kött-pepton-agar (primär-medium) vid 37 ° C. under dagen för att bilda kolonier synliga vid en förstoring av 2-5 s. eller det nakna ögat.

является посев. Nyckelsteget i förfarandet enligt mikrobiologisk analys av vatten sås. Eftersom varje prov sås minst 2 olika volymer. När kranvatten analys i varje kopp är tillverkad av 1-0.1 ml ren vätska och kontaminerad 0,01-0,001 ml. För inokulering av 0,1 ml eller mindre fluidvolym späds med destillerat (sterilt) vatten. Konsekvent framställa decimala utspädningar. 1 ml av var och en av dem är gjord i två petriskålar.

Avels fylld med näringsagar. Det måste först smälta och sval till 45 grader. Efter omröring, är det aktiva mediet kvar på en horisontell yta för stelning. Vid 37 grader. grödor odlas under hela dagen. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Den betraktade förfarande för mikrobiologisk vattenforskning tar hänsyn till resultaten av dessa rätter där antalet kolonier i området av 30 till 300.

luft

Det anses vara en transit grund för mikroorganismer. являются седиментация (оседание) и аспирация. De viktigaste metoderna för mikrobiologiska studier är luftsedimentering (sedimentering) och aspiration.

Mikroflora luftmiljö är godtyckligt uppdelat i variabel och konstant. Den första gruppen inkluderar jäst, kromogen kocker, spor bärande bacill coli och andra mikroorganismer som är resistenta mot torkning, exponering för ljus. Representanter variabel mikroflora, som tränger in i luften från deras vanliga habitat, lång behåller sin vitalitet.

I luften av stora städer mikroorganismer mycket mer än i luftmiljön på landsbygden. Över haven, skogarna finns mycket få bakterier. Luftrening lätta nederbörd: snö och regn. Inomhus mikrober mycket mer än i öppna utrymmen. Deras antal ökar på vintern i avsaknad av ordinarie ventilation.

sedimentering

считается простейшим. Denna metod för mikrobiologisk forskning inom mikrobiologi anses vara det enklaste. Det är baserat på sedimentering av dropparna och partiklarna på agarytan i en öppen petriskål under tyngdkraften. sedimenteringsmetoden kan inte exakt bestämma antalet bakterier i luften. Faktum är att i en öppen kopp för att fånga den fina fraktionen av de dammpartiklar och små droppar av bakteriell ganska svårt. På ytan bibehöll huvudsakligen stora partiklar.

Denna metod används inte för luftanalys. Denna miljö som kännetecknas av stora fluktuationer i hastigheten hos luftflödet. Sedimentering kan emellertid användas i frånvaro av mera sofistikerade anordningar eller elektrisk kraftkälla.

Bestämning av antalet mikrobiella utförs av Omelyansky metod. I enlighet därmed, i 5 minuter på en ytarea av 100 kvadrat agar. cm avvecklar ett antal bakterier är närvarande i 10 liter luft.

Beställ 535 "På enande mikrobiologiska undersökningsmetoder"

Bakteriologisk analys intar en viktig plats i den komplexa kliniska och laboratorie aktiviteter som syftar till diagnos, prevention och behandling av olika infektionssjukdomar. Men studien av miljön, de är inte begränsade.

Av särskild betydelse är den bakteriologiska analyser av biologiskt material på sjukhus. För forskning som bedrivs i vårdinrättningar, ökade krav. Syftet med ordning "på ett enande av mikrobiologiska undersökningsmetoder" är att förbättra den bakteriologiska analyser, förbättra kvaliteten och effektiviteten i mikrobiologisk diagnostik.

Mikroskopisk undersökning av smutsfläckar hos kvinnor

Det är en viktig metod för analys för diagnos av infektioner, sexuellt överförbara infektioner och opportunistiska infektioner (opportunistiska bakterier).

Mikroskopisk analys för att utvärdera den kvalitativa och kvantitativa sammansättningen av mikrofloran, kontrollera riktigheten av provtagning. Till exempel, närvaron av det vaginala epitelet i bomullstoppar tagna från cervikalkanalen indikerar ett brott mot reglerna för val av ett biologiskt prov.

Det sägs att mikrobiologisk undersökning i detta fall i allmänhet följs av en del problem. De är relaterade till det faktum att i den nedre genitaltrakten normalt fram en mångskiftande mikroflora som varierar vid olika åldrar. För att förbättra effektiviteten i forskning och har utvecklat standardiserade regler.

Diagnos av virusinfektioner

Den utförs genom förfaranden detekterings RNA- och DNA-patogener. De är baserade huvudsakligen på bestämning av nukleotidsekvenser i patologiskt material. För detta ändamål de molekylära sonder. De är artificiellt producerade nukleinsyror komplementära till (komplementär till) de virala syrorna märkta med en radioaktiv markör eller biotin.

Den egenheten av metoden upprepas kopiera det specifika DNA-fragmentet innehållande några hundratals (eller tiotals) nukleotidpar. replikation (kopiering) är att förlängningen kan börja endast i vissa enheter. primers (primers) som används för att skapa dem. De är syntetiserade oligonukleotider.

PCR diagnostik (polymeraskedjereaktion) är enkel i utförandet. Denna metod gör det möjligt att snabbt få resultatet med hjälp av en liten mängd av patologiskt material. Använda PCR-diagnostik identifierar akut, kronisk och latenta (dolda) infektioner.

När känsligheten hos denna metod anses mer föredraget. Men den nuvarande testsystem inte är tillförlitliga nog, så PCR diagnosen inte helt kan ersätta traditionella metoder.